關(guān)于BD _FACSAria流式細(xì)胞儀的那些事兒!
BD _FACSAria流式細(xì)胞儀是對細(xì)胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把的細(xì)胞亞群從中分選出來。多數(shù)流式細(xì)胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細(xì)胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標(biāo),而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說,它的細(xì)節(jié) 分辨率為零。
操作流程
1)打開電源,對系統(tǒng)進行預(yù)熱;
2)打開氣體閾,調(diào)節(jié) 壓力,獲得適宜的液流速度;開啟光源冷卻系統(tǒng);
3)在樣品管中加入去離子水,沖洗液流的噴嘴系統(tǒng);
4)利用校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品,調(diào)整儀器,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調(diào)定的基礎(chǔ)上,0和90散射的熒光強度zui強,并要求變異系數(shù)為??;
5)選定流速、測量細(xì)胞數(shù)、測量參數(shù)等,在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時選擇計算機屏上數(shù)據(jù)的顯示方式,從而能直觀掌握測量進程;
6)樣品測量完畢后,再用去離子水沖洗液流系統(tǒng);
7)BD _FACSAria流式細(xì)胞儀因為實驗數(shù)據(jù)已存入計算機硬盤(有的機器還備有光盤系統(tǒng),存貯量更大),因此可關(guān)閉氣體、測量裝置,而單獨使用計算機進行數(shù)據(jù)處理;
8)將所需結(jié)果打印出來。
注意事項
1)光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件,暴露的較強的光線下以后,需要較長時間的“暗適應(yīng)”以消除或降低部分暗電流本底才能工作;另外還要注意磁屏蔽;
2)光源不得在短時間內(nèi)(一般要1h左右)關(guān)上又打開;使用光源必須預(yù)熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常;
3)液流系統(tǒng)必需隨時保持液流暢通,避免氣泡栓塞,所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過過濾、消毒;
4)注意根據(jù)測量對象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等;
5)BD _FACSAria流式細(xì)胞儀特別強調(diào)每次測量都需要對照組。